Yazar "Rahamkulov, İlhom" seçeneğine göre listele

Listeleniyor 1 - 2 / 2
  • Küçük Resim Yok
    Öğe
    Herbisite Dayanıklılık Geni (CP4-EPSP Sentez) Içeren Transgenik Patates Hatlarının Geliştirilmesi
    (2019) Sümer, Safa; Rahamkulov, İlhom; Demirel, Ufuk; Çalışkan, Mehmet Emin; Bakhsh, Allah
    Amaç: Yabancı otlar diğer bitkilerde olduğu gibi patates bitkisinde de önemli kayıplara yol açmaktadır.Bu çalışmada herbisite dayanıklılık karakterinin Agrobacterium aracılığıyla iki farklı patateseaktarılması amaçlanmıştır.Materyal ve Metot: Bu amaçla, genetik aktarımı için “Lady Olympia” ve “Desiree” patates (Solanumtuberasum L.) çeşitlerinin yaprak ve boğumarası doku parçaları eksplant olarak kullanılmıştır. Genaktarımı yapmak için pCAMHE-EPSPS plazmidini içeren Agrobacterium tumefaciens bakterisininLBA4404 izolatları kullanılmıştır. Gen aktarım amacıyla kullanılan pCAMHE-EPSPS plazmidinde 35Spromotoru kontrolü altında CP4-EPSPS geni bulunmaktadır. Çalışmada, T-DNA bölgesinde bulunangusA geninin varlığı aday transgenik bitkilerin erken dönemde tespit edilmesini kolaylaştırmıştır.Bulgular: In vitro besi ortamında transgenik hücrelerin seçimi için 1.5 mM’lik Glifosat N-(fosfonometil)glisin en uygun konsantrasyon olarak bulunmuştur. Lady Olympia ve Desiree çeşitlerindetransformasyon etkinliği sırasıyla % 0,7 ve % 0,3 olarak hesaplanmıştır. Aday transgenik bitkilerdeyapılan GUS histokimyasal analizi, PCR deneyleri, kantitatif gerçek zamanlı PCR ve yatay akışlı ölçümçubuğu analizleri sonucunda CP4-EPSPS geninin transgenik patates hatlarında işlevsel olarakyer aldığı tespit edilmiştir.Sonuç: Yapılan glifosat herbisit uygulaması sonucunda da CP4-EPSPS geninin patatese karşı etkinliğiniortaya koymuştur. Geliştirilmiş transgenik patates hatları ıslah programında gen kaynağıolarak kullanılabilirler.
  • Küçük Resim
    Öğe
    Transgenik patateste farklı promotörlerin aktivitesinin karşılaştırılması
    (Niğde Ömer Halisdemir Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü, 2019) Rahamkulov, İlhom; Bakhsh, Allah
    Bu tez çalışmasında patatesten elde edilen yeşil dokuya özgü pRCA promotörü ile Arabidopsis thaliana bitkisinden elde edilen ve stres koşullarında uyarılabilen pRD29A promotörünün Lady Olympia patates (Solanum tuberosum L.) çeşidinde gen ifade seviyelerine bakılmıştır. Çalışmada konstitütif -35S CaMV promotörü kontrol olarak kullanılmıştır. Seçilen promotörler GUS-INT genini kontrol edecek şekilde pCAMBIA-1301 plazmidine yerleştirilmiştir. Bitki transformasyonu Agrobacterium tumefasiens bakterisinin LBA4404 suşu aracılığıyla sağlanmıştır. Eksplant olarak yaprak ve boğum araları kullanılmıştır. Elde edilen transgenik hatlar histokimyasal GUS analizi, PCR, gen ifadesini belirlemek için qRT-PCR ve fluorogenik assay analizi kullanılarak doğrulanmıştır. Laboratuvar koşullarında transgenik bitkilerin taranması için higromisin fosfotransferaz (hptII), en uygun konsantrasyonda (5 mg/l) kullanılmıştır. Transformasyon etkinliği % 0,98 olarak hesaplanmıştır. pRD29A içeren transgenik patateslerde GUS gen ifadesinin kontrol koşullara göre farklı abiyotik stresler altında 10 kattan fazla arttığı gözlemlenmiştir. pRCA promotöründe kök/yumru kısımlarına göre yapraklarda GUS gen ifadesi 4 kat artmıştır. Bu promotörlerin aktivitelerine bakılarak, ileride farklı genler ile beraber kullanılmaları durumunda patateste transgenik teknolojinin risklerini minimuma indirmek ve olumsuz çevre koşullarına dayanıklı patates hatları geliştirmek mümkün olabilir.