Protein İyon-Değişim Kromatografisi İçin Kaliksaren-Kriyojel Esaslı Yeni Tip Monolitik Kolonların Sentezlenmesi
Küçük Resim Yok
Tarih
2017
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Sunulan bu çalışmada; sülfonat, fosfonat ve karboksilat grupları içeren bazı kaliks[4]arenlerin (tetrafosfonato kaliks[4]aren, P-CLX-PO4, tetrasülfonato kaliks[4]aren, PCLX-SO3, ve tetrakarboksilato kaliks[4]aren, P-CLX-COOH) kriyojel esaslı monolitik destek katısına immobilizasyonu ve elde edilen sabit fazların protein iyon değişim kromatografisinde kullanılabilirlikleri incelenmiştir. İmmobilizasyon işleminde destek katısı olarak poly(2hidroksietilmetakrilat)-co-glisidilmetakrilat (P) kullanılmış ve yapısındaki epoksit grupları üzerinden kaliksaren immobilizasyonu gerçekleştirilmiştir. Elemental analiz, FTIR, SEM, izoelektrik nokta tayini, cıva porozimetresi ve titrimetrik analiz gibi yöntem ve teknikler kullanılarak sabit fazlar karakterize edilmiştir. P-CLX-PO4, P-CLX-SO3 ve P-CLX-COOH için yüzeye immobilize edilmiş kaliksaren miktarı sabit fazın gramı başına sırasıyla 173 mg/g, 125 mg/g ve 210 mg/g olarak hesaplanmıştır. Kromatografik deneyler hem lineer hem de lineer olmayan kromatografik şartlarda yürütülmüş ve böylece ayırma verimliliği ve protein adsorpsiyon kapasitesi gibi özellikler incelenmiştir. P-CLX-PO4, P-CLX-SO3 ve P-CLXCOOH için toplam dinamik adsorpsiyon kapasiteleri sırasıyla 7,7 mg/mL, 5,9 mg/mL ve 2,9 mg/mL olarak bulunmuştur. İyon-değişim mekanizmasının rolünü irdeleyebilmek amacıyla kromatografik veriler Yamamoto Modeli temelinde analiz edilmiş ve iyon-değişimin baskın mekanizma olduğu tespit edilmiştir. Destek katısına immobilize edilen kaliksaren molekülündeki fonksiyonel grubun türüne bağlı olarak alıkonma özelliklerinde önemli farklılaşmaların meydana geldiği anlaşılmıştır. Çalışılan 3 farklı sabit faz arasında en iyi verim P-CLX-PO4 ve P-CLX-SO3 ile elde edilmiş, P-CLX-COOH sabit fazının hem ayırma verimliliği hem de adsorpsiyon kapasitesi bakımından daha düşük performans sergilediği görülmüştür. Bu durum, sabit fazların zayıf ve kuvvetli katyon değiştirici özellikleri ile ilişkilendirilmiştir. Bazı model proteinlerin, özellikle P-CLX-PO4 sabit fazı üzerinde, kromatografik ayrılmaları başarılı bir şekilde gerçekleştirilmiştir. Supramoleküler kimyanın önemli üyelerinden olan kaliksaren kimyasının kriyojel kimyası ile ilk defa birleştirildiği bu çalışma, protein iyon-değişim kromatografisi için yeni tip sabit fazların tasarlanması noktasında yenilikçi yaklaşımlar sunmuştur.
Açıklama
15.09.2017
Anahtar Kelimeler
Nanobilim ve Nanoteknoloji, Malzeme Bilimleri, Özellik ve Test, Gıda Bilimi ve Teknolojisi, Malzeme Bilimleri, Biyomalzemeler, Protein, Adsorpsiyon, HPLC, Kaliksaren, Kriyojel, Ayırma, Kromatografi, İmmobilizasyon, Sabit Faz
